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Méthode d'analyse

Suivi de la Fermentation Malolactique ou FML dans les vins par chromatographie

La chromatographie de partage sur papier permet de différencier les acides organiques du vin : l'acide malique, tartrique, lactique succinique et citrique. Cette technique, même si elle ne remplace pas le dosage enzymatique de l'acide malique permet de savoir si la Fermentation Malolactique est commencée, en cours ou presque achevée.

Equipement :

• bocal en verre
• papier de chromatographie Watman n°1
• sèche cheveux
• pipette pasteur

Réactifs :

• butanol-1
• bleu de bromophénol
• acide acétique

Mode opératoire :

• préparation du solvant révélateur et migrateur :
  
  Mélanger 50 ml d'une solution de butanol à 1g/l de bleu de bromophénol avec 20 ml d'acide acétique dilué au 1/2. Ce mélange est peu stable et se conserve 1 mois
• préparation de la cuve
  
  Mettre 1 cm de mélange solvant au fond du bocal. Fermer le bocal et laisser saturer les vapeurs de solvant pendant 12 à 24 h avant de réaliser la première chromatographie. Le mélange peut être conservé et servir à plusieurs chromatographies (environ 15 jours)

Dépôt des échantillons et séparation des acides organiques :

• Tracer une ligne au crayon à 2-3 cm de l'extrémité du papier qui sera en contact avec le solvant
• Déposer en plusieurs fois 4 à 5 gouttes de l'échantillon sur cette ligne, le premier à 3 cm de l'extrémité de la feuille
• Sécher entre chaque goutte avec le sèche cheveux
• Déposer les échantillons à 2-3 cm les uns des autres
• Rouler le papier, les échantillons vers l'extérieur
• Introduire dans le bocal le bord inférieur trempant dans le solvant
• Laisser migrer 3 heures environ
• Retirer et laisser sécher sous une hotte ou à l'air libre

Résultats :

Remarques :

• volume d'échantillon nécessaire : 1 ml
• durée pour préparer 10 analyses : 20 minutes + 3 heures de migration

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